История препарата RU 486. Научные факты, история создания.

История препарата RU 486. Научные факты, история создания.
В дальнейшем клинические исследования показали, что боль в области брюшной полости, обусловленная сокращающим эффектом простагландина, — обычное явление. Оказалось также, что при той дозе RU 486, которая необходима для прерывания беременности (600 мг), не наблюдаются проявления антагонизма по отношению к глюкокортикоидам. Поэтому можно было не опасаться осложнений из-за того, что RU 486 вызывает такие нежелательные эффекты, связанные с антагонизмом к глюкокортикоидам, как сильная утомляемость и нарушение уровней электролитов и глюкозы в крови.

Как только эти исследования были окончены и проверены, компания Roussel-Uclaf обратилась в государственные здравоохранительные органы Франции за разрешением на производство RU 486 для продажи. Оно было получено 23 сентября 1988 г.

Очень много работы было сделано для создания и экспериментов данного препарата.

Желаю Вам успехов!

Штаммы-продуценты, которые используются при получении ферментов

У других бактерий применяют трансдукцию либо транспозоновый мутагенез. У грамположительных бактерий успешно применяют трансформацию. Например, в селекции промышленного штамма В. subtilis Marburg был использован комплексный подход. Дикий тип образовывал около 10 ед. мл-1 амилазы. Его регуляторный мутант по гену amyR3 давал амилазы в 5 раз больше. А мутант по гену рар, который отвечает за секрецию фермента, обеспечивал увеличение выхода амилазы в 3 раза. Эти локусы были введены путем трансформации в штамм В. subtilis Marburg и дали усиление эффекта в 14 раз. Еще более продуктивные штаммы получают посредством мутаций на антибиотикорезистентность. Так, мутант С-108 продуцировал амилазы в 5 раз больше и протеазы в 80 раз больше, чем бактерии дикого типа. Хромосомальной ДНК из этих мутантов трансформировали указанный штамм. Продуктивность его по амилазе возросла в 1500 раз и составила 15 000 ед. мл-1.

Штаммы-продуценты, которые используются при получении ферментов

Что касается контроля трансляции, то существует три способа ее модифицировать:

а) увеличить стабильность мРНК;

б) повысить эффективность сайтов инициации трансляции;

в) повысить элонгацию цепи.

Мутации, изменяющие секрецию ферментов, особенно полезны для повышения выхода ферментов, хотя молекулярные механизмы этих процессов редко расшифровываются. Такие мутации получают селекцией на устойчивость к различным антибиотикам, изменяющим структуру клеточной стенки. Например, по устойчивости к циклосерину и так далее.

Конструирование продуцентов ферментов с помощью генетической инженерии

Для получения рекомбинантов при селекции продуцентов ферментов обычно используется техника переноса генов. У грамотрицательных бактерий (в основном Е. coli) применяют конъюгацию, основанную на мобилизации хромосомы с помощью конъюгативных плазмид. 

Штаммы-продуценты, которые используются при получении ферментов

Мутанты, нечувствительные к катаболитной репрессии, представляют ценность в нескольких отношениях. Во-первых, они синтезируют ферменты на ранних стадиях ростового цикла культуры.

-вторых, они всегда секретируют ферменты на более высоком уровне и допускают использование дешевых субстратов. Такие мутанты получают несколькими путями:

- простой отбор мутантов на агаризованных средах, содержащих высокие концентрации глюкозы или глацерола:

- путем селекции на рост в присутствии антиметаболитов, например пеллобиозы. Таким путем были получены, например, продуценты глюкозидазы из Trichoderma;

- отбор на способность к спорообразованию в присутствии глюкозы путем пасеризации культур.

Что касается контроля трансляции, то существует три способа ее модифицировать:

а) увеличить стабильность мРНК;

Штаммы-продуценты, которые используются при получении ферментов

 Соответственно мутации, приводящие к устранению потребности в индукторе либо снимающие репрессию, обеспечивают конститутивный синтез данного продукта. Так, фенил-бета-D-галактозид можно использовать для отбора на конститутивный синтез бета-D-галактозидазы у Е. coli. Примером получения продуцента промышленного масштаба может служить синтез глюкоизомеразы у Streptomyces phaechromogenes. Этот фермент используется для метаболизма ксилозы и ликсозы, однако ликсоз не индуцирует его синтез. Поэтому проводят отбор мутантов, выросших на среде с ликсозой, поскольку они будут иметь конститутивный синтез этого фермента.

Мутанты, нечувствительные к катаболитной репрессии, представляют ценность в нескольких отношениях. Во-первых, они синтезируют ферменты на ранних стадиях ростового цикла культуры. 

Штаммы-продуценты, которые используются при получении ферментов

Известно, что эта регуляция осуществляется на пяти основных стадиях:
1) связывание РНК-полимеразы и инициация транскрипции;
2) индукция или дерепрессия транскрипции;

3) катаболитная репрессия транскрипции;

4) связывание рибосом и стабильность мРНК;

5) проникновение фермента через мембрану и стенку клетки с последующим процессингом (если это внеклеточный фермент).

Мутанты по РНК-полимеразе легко выделяют с помощью селекции на антибиотикоустойчивость (например, к рифампицину или стрептолидигину). Такой подход использовался в получении продуцентов альфа-амилазы у В. subtilis. Нарушение синтеза данного фермента происходило вследствие изменения узнавания мутировавшей РНК-полимеразой промоторов для генов а-амилазы.Индукция или репрессия ограничивают экспрессию многих оперонов внеклеточных ферментов.

Как мы создаем реальность. Занимайтесь позитивным программированием реальности!

И вам может не понравиться, когда это произойдет, поскольку ваша реализованная визуализация, может быть перегружена непредвиденными последствиями.

Вот почему лучше всего, визуализировать конечный результат или эффект от реальности, которую вы хотите, результат который обязательно имел бы место произойти, нежели воображать какой-то особый исход.

Это дает коллективному подсознанию больше путей, через которые оно может реализовать вашу реальность быстрее. К тому же, оно может сконструировать даже лучшее будущее, чем то, которое вы спланировали своим ограниченным сознательным умом.

К примеру, вы можете разработать, целую стратегию по созданию себе более приятной и выгодной профессии. Вы думаете, что неплохим вариантом могла бы стать работа ювелира. И вы немедленно приступаете к программированию данной реальности.

Как мы создаем реальность. Занимайтесь позитивным программированием реальности!

Пособие по визуализации

Приведите себя в это состояние и визуализируйте. Нет особой необходимости в трансе и церемониях. Это обычная визуализация, которую вы выполняете, пока водите машину, гуляете или занимаетесь какой-нибудь скучной работой.

Также, вам следует запомнить, что не следует чересчур конкретизировать детали, при составлении визуализации.

Чем больше деталей вы включаете в свою визуализацию, тем больше нитей должно быть потянуто через всю планету, чтобы ваша мечта стала реальностью. Сделайте свои визуальные заказы квантовому полю простыми. Для этого они должны быть короткими и запоминающимися, чтобы их было легко воспроизводить, длительностью не более нескольких секунд. Затем, повторяйте их как можно чаще до тех пор, пока они не реализуются.

Однако будьте осторожны с тем, о чем вы воображаете, поскольку если вы часто будете представлять это себе, то вы это обязательно получите.